生物化学实验指导-LSW(共16页).doc

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资源描述

实验一 植物DNA的提取与测定一、目的本实验目的是学习从植物材料中提取和测定DNA的原理和方法,进一步了解DNA的性质。二、原理细胞中的DNA绝大多数以DNA-蛋白复合物(DNP)的形式存在于细胞核内。提取DNA时,一般先破碎细胞释放出DNP,再用含少量异戊醇的氯仿除去蛋白质,最后用乙醇把DNA从抽提液中沉淀出来。DNP与核糖核蛋白(RNP)在不同浓度的电解质溶液中溶解度差别很大,利用这一特性可将二者分离。以NaCl溶液为例:RNP在0.14 mol/L NaCl中溶解度很大,而DNP在其中的溶解度仅为纯水中的1。当NaCl浓度逐渐增大时,RNP的溶解度变化不大,而DNP的溶解则随之不断增加。当NaCl浓度大于1mol/L时,DNP的溶解度最大,为纯水中溶解度的2倍,因此通常可用1.4 mol/L NaCl提取DNA。为了得到纯的DNA制品,可用适量的RNase处理提取液,以降解DNA中搀杂的RNA。关于植物总DNA的提取主要有两种方法:1 CTAB法:CTAB(十六烷基三甲基溴化铵,hexadecyltrimethylammonium bromide

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