紫外分光光度法测定蛋白质含量一、 实验目的1. 学习紫外光度法测定蛋白质含量的原理；2. 掌握紫外分光光度法测蛋白质含量的实验技术。二、 实验原理1.测蛋白质含量的方法主要有：测参数法：折射率、相对密度、紫外吸收等；基于化学反应:定氮法、双缩脲法、Folin酚试剂法等。本实验采用紫外分光光度法。2.蛋白质中的酪氨酸和色氨酸残基的苯环中含有共轭双键，因此，蛋白质具有吸收紫外光的性质，其最大吸收峰位于280nm附近（不同蛋白质略有不同）。在最大吸收波长处，吸光度与蛋白质溶液的浓度服从朗伯比尔定律。利用紫外吸收法测蛋白质含量的准确度较差，原因有二：对于测定那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异较大的蛋白质，有一定误差，故该法适于测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质；样品中含有的嘌呤、嘧啶等吸收紫外光的物质，会出现较大干扰。三、 仪器与试剂TU1901紫外可见分光光度计、标准蛋白质溶液3.00mgmL-1、0.9%NaCl溶液、试样蛋白质溶液。 10mL比色管、1cm石英比色皿、吸量管。四、 实验步骤1.绘制吸收曲线
