纤维素酶活力的测定2页.doc

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资源描述

-糖苷酶活力的测定(CMC)一 目的:掌握CMC酶活力测定纤维素酶的原理及测定方法。 原理:纤维素酶能从底物羧甲基纤维素钠(CMC-Na)中分解出还原糖,还原糖又同3,5-而硝基水杨酸发生反应,产生一种黄橙混合色,用分光光度计可测定其色度,计算酶活力。二 试剂:13,5-而硝基水杨酸显色剂(又称DNS试剂): 称取10g3,5-而硝基水杨酸,溶于蒸馏水中,加入20g分析纯NaOH,200g酒石酸钾钠,加税500ml,升温溶解后,加入重蒸酚2g,无水亚硫酸钠0.5g,加热搅拌,待全部溶解后,定容至1000ml。贮存于棕色瓶中,室温保存,放置一周后使用。20.1mol/L pH4.5醋酸-醋酸钠缓冲液:称取结晶醋酸钠(CH3COONa.3 H2O)13.61g,醋酸(CH3COOH)6.00g,用蒸馏水溶解,并定容至1000 ml,配好后用pH计矫正。31mg/ml葡萄糖标准溶液:准确称取100mg分析纯葡萄糖(预先在70、600nm汞柱下干燥5h至恒重),用少量蒸馏水溶解并定容至100ml,冰箱中保存备用。4代测酶液:称取酶粉1.0g(或吸

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