组培具体操作2页.doc

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植物组织培养具体操作二、植物组织培养过程(以菊花叶片为外植体)1、培养基的配制:MS培养基母液的配制:MS培养基含有近30种营养成分,为了避免每次都要对这几十种成分进行称量,可将培养基中的各种成分,按照比例配制成MS培养基干粉,用时直接取用即可。每42g MS培养基加1L蒸馏水。MS培养基的配制:取1000mL烧杯,称取42g MS培养基干粉于不锈钢盆中,加水至800ml。使用电磁炉加热使琼脂溶解,按照要求加入浓度为0.5mg/ml的激素NAA0.2ml,定容至1000ml,用1mol/L NaOH和1mol/L HCl调节pH至6.0。将配好的培养基迅速分装至150ml组培瓶中,拧上盖子,整齐的放入到高压蒸汽灭菌锅的物料篮内,121下灭菌20min。将培养皿用报纸包好,一起放入灭菌锅进行灭菌。高压蒸汽灭菌锅的使用注意事项:1、排气管通入到盛水的桶中,避免蒸汽将人烫伤。2、放入灭菌物品后,拧紧阀门,打开开关进行灭菌。3、在压力表归零之前切勿试图开盖。2、接种仪器及器具仪器:超净工作台 光照培养箱 接种器具杀菌器器具:枪形镊 剪刀 器

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