组织切片各个步骤中经常遇见的问题和克服策略摘要:据统计,常规的组织切片实验要历经9个步骤,每个步骤又分为220个小步骤,整个实验完成需四个步骤以上。本文就组织切片染色各个步骤中常见问题及解决方法进行概括总结,与同道中人共勉之。据统计,常规的组织切片实验要历经9个步骤,每个步骤又分为220个小步骤,整个实验完成需四个步骤以上。本文就组织切片染色各个步骤中常见问题及解决方法进行概括总结,与同道中人共勉之。常规组织切片的制作过程较繁琐,按具体制作效能分为固定、取材、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色、封片等九大步骤。其中脱水有12 个步骤、透明有2 个步骤、浸蜡有3 个步骤、染色有23 个步骤,一般要经过总计4045 个步骤,各个实验室根据自身的实际情况及工作习惯各有不同。1 固定和取材组织切片的固定剂主要为甲醛和酒精,固定剂可与蛋白质交联结合、使之变性,组织硬化、结构固定,此外其本身的变性物质可与染料结合,增强着色能力。同时,固定交联和沉淀蛋白质、脂肪、糖、酶等细胞内物质成分,产生不同的折光率,使得光学显微镜下易于更清晰地观察组织细胞的微细结构。1.1 减