细胞生物实验设计-细胞融合(共1页).docx

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一、实验目的1.了解聚乙二醇PEG诱导细胞融合的原理与技术2.学习并了解细胞融合技术二、实验原理细胞融合又称细胞杂交,是指两个或两个以上的细胞合并成一个细胞的现象。细胞融合技术是细胞工程骨干技术,除了用于一些基础性研究外,在植物方面主要用于合成新药,在动物方面主要用于产生单克隆抗体。诱导细胞融合的因素主要有三类:生物因数,物理因数,化学因素。本实验主要应用化学因数PEG诱导细胞融合。聚乙二醇PEG结构为HOH2C(CH2OCH2)nCH2OH,相对分子质量在2006000。PEG能够改变各类细胞的膜结构,使两细胞接触点处质膜的脂类分子发生疏散和重组,由于两细胞接口处双分子层质膜的相互亲和以及彼此的表面张力作用,从而使细胞发生融合。三、实验材料与器械胃粘膜上皮细胞,脐血干细胞20ml离心管若干,试管若干,50%聚乙二醇,PKH26染料,RPIM1640完全培养基,无血清培养基,完全培养基,低俗离心机,恒温水浴锅, 96孔板,荧光显微镜四、实验步骤(一)1.胃粘膜上皮细胞洗涤后去除消化酶,制备成单细胞悬液,在室温下进行试验2.将

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