细胞的原代培养4页.doc

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细胞原代培养【实验目的】1. 理解细胞原代培养原理2. 熟悉细胞原代培养方法与过程3. 了解细胞原代培养的应用 4. 独立进行细胞原代培养操作【实验原理】1、 原代培养实验原理 细胞培养是生物学和医学研究中最常用的手段之一,可分为原代培养和传代培养两种。原代培养是直接从生物体获取组织或器官的一部分进行培养,即组织直接从机体获取后,通过组织块长出单层细胞,或者用酶消化或机械方法将组织分散成单个细胞开始培养,在首次传代前的培养可认为是原代培养。由于培养的细胞刚刚从活体组织分离出来,故更接近于生物体内的生活状态。这一方法可为研究生物体细胞的生长,代谢,繁殖提供有力的手段。同时也为以后传代培养创造条件。原代培养的过程指动物的组织或器官从机体取出后,经机械法或各种酶类(常用胰蛋白酶)和鳌合剂(常用EDTA)处理,使之分散成单个细胞,加入适量培养基,置于合适的培养容器中,在无菌、适当温度和一定条件下,使之生存、生长和繁殖的过程。原代培养的方法有:a. 组织块法:在平皿中用弯头剪把组织尽量剪碎,每个组织块小于1mm3大小。用Hanks液洗涤23

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