细菌培养及菌体收集7页.doc

上传人:晟*** 文档编号:7029145 上传时间:2021-09-17 格式:DOC 页数:8 大小:75KB
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资源描述

基因工程实验流程参考图:碱变性法提取质粒DNA序列比对以及系统发育树的建立阳性克隆送样测序质粒DNA酶切验证阳性克隆筛选转化E.coli感受态制备PCR产物纯化细菌基因组DNA的16srRNA片段PCR扩增细菌基因组DNA的电泳鉴定细菌基因组DNA的提取与pMD18-T载体的连接确定菌株分类地位细菌培养及菌体收集挑取单菌落于5 ml 2216E培养基中,8培养, 100 rpm转速,振荡120 h后,12 000 rpm离心15 min。弃去上清液,加入10 ml TE洗涤离心后,用10 ml TE溶解菌体,混匀,20保存备用。实验一:菌株基因组DNA的提取 (CTAB 方法)CTAB/NaCL溶液配制:CTAB/NaCL溶液(10% CTAB,0.7M NaCL 4.1gNaCL 溶于80ml水中,缓慢加入10gCTAB,加热

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