0a840c6bb51981d8ce69a147a3f8f630.pdf 分子生物学综合实验论文 题 目: 绿色荧光蛋白(GFP)的基因克隆及表达 中国黄石 2010年12月 绿色荧光蛋白（GFP）基因的克隆与表达 胡丽丹 （湖北师范学院生命科学院0803班 湖北 黄石 43500）0a840c6bb51981d8ce69a147a3f8f630.pdf I 摘要：绿色荧光蛋白（GFP）是一类存在于包括水母、水螅和珊瑚等腔肠动物 体内的生物发光蛋白。用碱裂解法提取的的质粒 pEGFP-N3 和 pET-28 经过 BamH I和 Not I双酶切连接后，得到 pET-28-pEGFP-N3 重组质粒。取部分的 重组质粒做酶切实验，验证重组质粒的存在性，剩下的重组质粒导入表达菌 E. coLi BL-21大肠杆菌感受态细胞中。重组有GFP基因的 E. coLi BL-21，在含有 1 L/mL 的卡纳霉素的LB培养基上培养。当 A 600 达到 0.7时，用终浓度为 0.8 mM 的异丙基硫代-D-半乳糖苷（IPTG）诱导培养3小时，离心得到下层绿 蓝色沉淀物即可。 关键词：绿色荧光蛋白
