考马斯亮蓝法测蛋白质含量5页.doc

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资源描述

标准曲线制作考马斯亮蓝法测蛋白质含量一、 标准曲线一般用分光光度法测物质的含量,先要制作标准曲线,然后根据标准曲线查出所测物质的含量。因此,制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术。二、 蛋白质含量测定方法1、 凯氏定氮法2、 双缩脲法3、 Folin-酚试剂法4、 紫外吸收法5、 考马斯亮蓝法三、 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量标准曲线制作(一)、试剂:1、 考马斯亮蓝试剂:考马斯亮蓝G250 100mg溶于50ml 95%乙醇,加入100ml 85% H3PO4,用蒸馏水稀释至1000ml,滤纸过滤。最终试剂中含0.01%(W/V)考马斯亮蓝G250,4.7%(W/V)乙醇,8.5%(W/V)H3PO4。2、 标准蛋白质溶液:纯的牛血清血蛋白,预先经微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量,根据其纯度同0.15mol/LNaCl配制成100ug/ml蛋白溶液。(二)、器材:1、722S型分光光度计使用及原理()。2、移液管使用()。(三)、标准曲线制作:试管编号0123456

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