茚三酮显色法测定氨基酸的含量一原理:凡含有自由氨基的化合物,如蛋白质、多肽、氨基酸的溶液与水合茚三酮共热时,能产生紫色化合物,可用比色法进行测定。氨基酸与茚三酮的反应分两个步骤。第一步是氨基酸被氧化形成CO2、NH3和醛、茚三酮被还原成还原型茚三酮;第二步是所形成的还原型茚三酮与另一个茚三酮分子和NH3缩合生成有色物质。二仪器:721型分光光度计台天平 减压蒸馏器 干燥 容量瓶 移液枪烧杯 试管架 试管 水浴锅。三药品:(1)标准氨基酸溶液:配制成0.3mmol/L 溶液(2)pH5.4,2mol/L 醋酸缓冲液:量取86mL 2mol/L 醋酸钠溶液,加入14mL 2mol/L乙酸混合而成。用pH 检查校正。(3)茚三酮显色液:称取170mg 茚三酮和30mg 还原茚三酮,用20mL 乙二醇甲醚溶解(4)60乙醇。(5)样品液:每毫升含0.550g 氨基酸。茚三酮若变为微红色,则需按下法重结晶:称取5g 茚三酮溶于1525mL 热蒸馏水中,加入0.25g 活性炭,轻轻搅拌。加热30m