荧光定量PCR步骤(共2页).docx

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2.3.2 反转录反应2.3.2.1去除基因组DNA反应 按如下成分于冰上配制反应混合液,为了保证反应液配制的准确性,进行各项反应时,应先按反应数+2的量配制Master Mix,然后再分装到每个反应管中,最后加入RNA样品。试剂使用量5gDNA Eraser Bffer2.0 lgDNA Eraser1.0 lTotal RNA1gRNase Free dH2Op to 10 l 42水浴2 min,冰上放置。2.3.2.2 反转录反应 反应液配制请在冰上进行。为了保证反应液配制的准确性,进行各项反应时,应先按反应数+2的量配制Master Mix,然后再分装10 l 到每个反应管中。轻柔混匀后立即进行反转录反应。试剂使用量步骤1的反应液10.0 lPrimeScript RT Enzyme Mix I1.0 lRT Primer Mix1.0 l5PrimeScript Bffer 24.0 lRNase Free dH2O4.0 l

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