荧光原位杂交FISH实验步骤与方法(共6页).docx

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资源描述

FISH实验步骤一、实验仪器:荧光显微镜:高速离心机:可达12000r/min高压灭菌锅:160以上杀菌恒温箱:为杂交提供恒定温度恒温水浴锅照相机(与荧光显微镜配套):荧光捕捉图片二、试剂的配制:1、0.2mol/ L (pH7.4)磷酸缓冲溶液(PB) 试剂为NaH2P042H20和Na2HP0412H2O。-02M的NaH2P04溶液: 31.2g NaH2P042H20,加蒸馏水1000mL溶解-02M的Na2HP04溶液: 71.632g Na2HP0412H2O 加蒸馏水至1000ml溶解-02M (pH7.4)磷酸缓冲溶液(PB) : 19ml的NaH2P04溶液和81ml的Na2HP04溶液充分混合高压灭菌,常温保存。2、0.03 mol/ L磷酸盐缓冲溶液((PBS)试剂为NaCl和磷酸缓冲溶液PB-0.03MPBS溶液:22.8gNaCl ,150ml磷酸缓冲溶液(PB) ,加蒸馏水至1000ml,混匀-0.02 MPBS溶液:取10

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