生物技术综合大实验原核系统表达的绿色荧光蛋白的纯化宋捷（2012014069） 纪成功 孔令浩 王玉康 王鹏程 董奉新（西北农林科技大学）摘要：绿色荧光蛋白（GFP）的提纯是一套十分成熟的蛋白质提纯系统，本教学实验使用原核的大肠杆菌系统，通过转化带有GFP基因的原核表达载体到BL21表达菌株中，通过氨苄抗性筛选，用阿拉伯糖诱导表达。通过硫酸铵盐析，疏水层析，阴离子交换柱层析，凝胶过滤层析，各级纯化用紫外显色和SDS凝胶电泳检测，终末纯化后纯度较高。本实验较为成功的提取提纯了GFP，并较好训练蛋白质提纯技术。关键词：GFP 蛋白提纯 疏水层析 离子交换层析 凝胶过滤层析1. 介绍：GFP最早是由下村修等人在1962年在一种学名Aequorea victoria的水母中发现。其基因所产生的蛋白质，在蓝色波长范围的光线激发下，会发出绿色萤光。分子质量约为27kd，有238各氨基酸基团，三维结构为 圆柱，圆柱两端由一些较短的 螺旋盖住，圆柱中央是几段 螺旋，生色团位于圆柱中央。该结构性质稳定。本实验通过该分子的较为稳定，疏水特性，易电离成阳离子，
