植物组织中可溶性蛋白质含量的测定-考马斯亮蓝 G 250 染色法一、原理 考马斯亮蓝 G 250 （ Coomassie brilliant blue ， G-250 ）法是利用蛋白质 染料结合的原理，定量地测定微量蛋白质浓度的快速、灵敏的方法。 考马斯亮蓝 G-250 存在着两种不同的颜色形式，红色和蓝色。它和蛋白质通过范德瓦尔键结合，在一定蛋白质浓度范围内，蛋白质和染料结合符合比尔定律。此染料与蛋白质结合后颜色由红色形式转变成蓝色形式，最大光吸收由 465 nm 变成 595 nm ，通过测定 595 nm 处光吸收的增加量可知与其结合蛋白质的量。 蛋白质和染料结合是一个很快的过程，约 2 min 即可反应完全，呈现最大光吸收，并可稳定 1 h ，之后，蛋白质染料复合物发生聚合并沉淀出来。此法灵敏度高，易于操作，干扰物质少，是一种比较好的定量法。其缺点是在蛋白质含量很高时线性偏低，且不同来源蛋白质与色素结合状况有一定差异。 二、实验材料、试剂与仪器设备 （一）实验材料 植物材料。 （二）试剂 1. 标准蛋白质溶液（ 1
