细胞换液与传代(共2页).docx

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贴壁细胞换液材料:吸管,废液缸(一同紫外,30min),PBS缓冲液( PBS缓冲液是磷酸缓冲盐溶液,一般作为溶剂作为溶解保护试剂的作用,具有盐平衡、可调整的适宜PH缓冲作用),培养液(从冰箱取出,放在显微镜桌子上,不能紫外)1. 紫外2. 镜下观察细胞形态,是否贴壁生长3. 将培养液倒入废液缸4. 加2mlPBS(将培养瓶竖立,向没有细胞的一面吹,目的为了清洗),轻摇使瓶底铺满PBS,倒入废液缸,重复两次。5. 将培养瓶竖立,加4ml培养液(一定不要从细胞贴壁面加入培养液,应从侧壁加入,以免冲落细胞),后放平培养瓶,观察细胞情况后。6. 做好标记(换液时间、细胞种类、操作人员等信息),再次用酒精喷培养瓶,后放置培养箱。贴壁细胞传代1. 【消毒台面】紫外:吸管、离心管、移液枪、枪头、培养皿(培养瓶)、废液缸 ;常温放置:PBS,DMEM培养基(含各种aa和G的培养基,分高糖型有利于细胞停泊一个位置,适用于生长较快,附着困难的肿瘤细胞和低糖型),胰酶 2. 取细胞观察(显微镜消毒)(一般选择生长80%的细胞)3. 倒掉培养液,用2m

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