设计跨内含子引物的方法3页.docx

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设计跨内含子引物的方法一、 为什么要设计跨内含子的引物区别或消除gDNA的扩增二、 如何设计1、 在pubmed上找到目标基因的DNA序列以及其内含子和外显子情况步骤:打开NCBI主页面,选GENE,输入基因名称,找到符合要求的基因,links到geneback即可显示出该基因DNA的信息,这是基因组DNA,从mRNA选项中JION后面的是外显子的位置,为了以后的操作,可以把这个DNA序列、外显子和CDS序列的起至位置记下来。2、 在pubmed上找到目标基因的mRNA序列步骤:打开NCBI主页面,选GENE,输入基因名称,找到符合要求的基因,点击进入基因页面,即可显示出这个基因的mRNA信息,最后的ORIGIN是CDNA序列,把它记下来。注:最好能找到以NM或XM开头的序列,以此做为设计引物的模板。 NCBI RefSeq (美国国立生物技术信息中心参考序列库) 是目前世界上最完整和最具有权威性的人类基因组编码mRNA序列数据库。它已收集了大约17,500个经cDNA测序证实的NM序列,还有大约10,000个主要由计算机推测产生

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