精选优质文档-倾情为你奉上在过去几年里,新一代DNA 测序技术平台在那些大型测序实验室中迅猛发展,各种新技术 犹如雨后春笋般涌现。之所以将它们称之为新一代测序技术(next-generation sequencing), 是相对于传统Sanger 测序而言的。Sanger 测序法一直以来因可靠、准确,可以产生长的 读长而被广泛应用,但是它的致命缺陷是相当慢。十三年,一个人类基因组,这显然不是理 想的速度,我们需要更高通量的测序平台。此时,新一代测序技术应运而生,它们利用大量 并行处理的能力读取多个短DNA 片段,然后拼接成一幅完整的图画。 Sanger 测序大家都比较了解,是先将基因组DNA 片断 化,然后克隆到质粒载体上,再转化大肠杆菌。对于每个测序反应,挑出单克隆,并纯化质 粒DNA。每个循环测序反应产生以ddNTP 终止的,荧光标记的产物梯度,在测序仪的96 或384 毛细管中进行高分辨率的电泳分离。当不同分子量的荧光标记片断通过检测器时, 四通道发射光谱就构成了测序轨迹。 在新一代测序技术中,片断化的基因组DNA 两侧连上接头,随后运用不同的步骤来产生几