“生物化学实验”理论知识考查题(共10页).docx

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精选优质文档-倾情为你奉上1.酶有什么不同于一般催化剂的特性?在酶的分离纯化过程中要注意哪些环节?1、高效性2、专一性3、条件温和 4、酶活性的可调控性 5、酶催化的活性与辅酶、辅基和金属离子有关6、不稳定易失活酶是一种特殊的蛋白质,在分离纯化过程中需要注意温度以及PH值等的控制,注意在纯化过程中所使用的缓冲溶液的离子强度的控制(常用PBS缓冲溶液),在实际纯化过程中,一般要在低温冰箱中进行,缓冲溶液中注意加入EDTA二钠盐(1-5mM)螯和重金属离子一般避免酶失活。2.如何评价蛋白质纯化方法的优劣?判断分离提纯方法的优劣,一般用两个指标来衡量,一是总活力的回收;而是比活力的提高倍数。理想的分离提纯方法希望比活力和总活力越高越好,但两者往往不可兼得。因此在考虑分离条件和方法时,需要在比活力多提高一些和总活力多回收一些作适当的选择。3、纯化蛋白质的层析方法有哪些?凝胶过滤层析;离子交换层析;疏水层析;亲和层析;聚焦层析;高效液相层析。4、请回答Q Sepharose-柱层析法纯化蔗糖酶的基本原理是什么?离子交

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