酵母菌感受态制作及转化(共1页).doc

上传人:晟*** 文档编号:7643114 上传时间:2021-11-12 格式:DOC 页数:1 大小:12.50KB
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精选优质文档-倾情为你奉上Y187 酵母感受态制作及转化1)挑新鲜单菌落 Y187 于 8 ml YPDA 培养液, 30,250 rpm 培养 16-18h;2)至 OD6001.5,1:10 转接,此时 OD6000.3;3)30,250 rpm,4-7 h,每 2 h 检测一次,直到 OD600=0.4-0.6;4)转入 2 个 50 ml 离心管,5100 rpm,5 min,弃上清;5)加入 1/2 V ddH2O,洗涤细胞,5100 rpm,5min,弃上清;6)每管中分别加 1 ml 1TE/LiAc,冰上混匀,10000 rpm,15 s,去上清;7)每管中分别加 0.5 ml 1TE/LiAc,冰上混匀,10000 rpm,15 s,去上清;8)每管中分别加 0.5 ml 1TE/LiAc,冰上混匀,10000 rpm,15 s,去上清;9)每管中分别加 0.4 ml 1TE/LiAc,每管 100 ul 分装;10)分别加入 100 ng 左右 DNA(plasmid)和 0.1 mg 鲑鱼 DNA

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