精选优质文档-倾情为你奉上双染法检测细胞凋亡(2011-11-16 20:38:42) 标签： 今天用Annexin V-EGFP/PI双染法检测树突状细胞的凋亡情况，存有下面几个问题：1、对照组细胞体积太少，根本不够调试细胞团位置（FSC和SSC参数）、自身荧光和荧光补偿的。大约需要3mL的细胞悬液才能够进行调试。 2、正式上样检测时应该从对照管开始，也就是说前面用作仪器条件调试的还要重新走样。这样在编辑模板时，应该按照实际需要检测的样品管数进行设置。 原理： 在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（Phosphatidylserine, PS）位于细胞膜的内侧，但在细胞凋亡的早期，PS 可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中。Annexin-V 是一种分子量为35.8KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与PS 高亲和力特异性结合。本试剂盒采用重组人Annexin VEGFP融合蛋白作为荧光探针，利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。碘化丙啶(Propidine Iodide, PI)
