精选优质文档-倾情为你奉上成年小鼠心脏灌流实验材料:需要观察脑切片的小鼠试剂/试剂盒:乙醚;生理盐水(37水浴);4%PFA;30%蔗糖仪器:蠕动泵;剪刀;镊子;针头;导管实验步骤:1、准备实验器材:两个锥形瓶(1个装生理盐水,一个装4%多聚甲醛,记得要用封口膜封口)2、用生理盐水冲洗导管,并排除管内气体。(灌流时选用雄性动物比选用雌性动物要好,原因是雌性动物受其激素周期影响,雄性的结果更为可靠)3、在密闭容器内加适量乙醚,麻醉小鼠。(需要注意的是,小鼠清醒一点比死掉要好,防止血液凝固给灌流带来阻力)4、待小鼠麻醉后立即将其用针头固定在泡沫板上(用针头插住四肢)。5、一只手用镊子扯起胸部皮肤,另一只手用剪刀剪开胸腔的皮肤和肋骨,暴露出心脏和肝脏。6、将注射针头插入小鼠左心室(如针头不稳可用镊子将其固定在泡沫板上),同时将小鼠肝脏减掉,以使血液流出。灌流速度5.8rpm。(灌注生理盐水的时间维持在10min左右,血液排除后四肢、肝脏和舌头会变白)7、对小鼠进行剪尾取样,以备测定其基因型。同时,将小鼠信息卡片上记录灌流信息,并将