1、1药物分析绪论1. 药品质量管理规范包括药物非临床研究质量管理规范（GLP ）， 药物临床试验质量管理规范（GCP），药品生产质量管理规范（GMP）， 药品经营质量管理规范（GSP ）。2. GAP：中药材生产质量管理规范ICH：人用药品注册技术要求国际协调会第一章：药品质量研究的内容与药典概况1.国家药品标准：是药品生产、供 应、使用、检验和药政管理部门共同遵循的法定依据国家药品标准：国务院药品监督管理部门颁布的中华人民共和国药典和药品标准。2.中国人民共和国药典简称（中国药典），英文 缩写为 （ChP），美国 药典简写为（USP-NF ），英国药典简写为（BP）,日本药 典简写为（JP ）
2、。欧洲药典（EP），国际药典（Ph.Int）3. 中国药典 ，内容分别包括 为（凡例）、 （附录）、 （正文）。至今已出版十版：（1953、1963 、1977、1985、1990、1995、2000、2005、2010、2015）附录的组成：包括制剂通则、通用 检测方法和指导原则。4.物理常数：其测定结果不仅对药品具有鉴别意义，也可反映药品的纯度，是 评价药品质量的主要指标之一5.阴凉处：（指不超过 20） 凉暗处：（避光并不超过 20） 冷处、冷水：（指 210） 常温、室温：（指 1030）冰浴：（指约 0） 放冷：（放冷至室温）6.对照品和标准品的区别药品标准物质：指药品标准中物理和化
3、学测试及生物方法试验用，具有确定特性量值，用于校准 设备、评价测量方法或者给供试药品赋值的物质，包括 标准品、 对照品、对照药材、参考品。标准品：用于生物检定、抗生素或生化 药品中含量或效价测 定的标准物质，按效价 单位或 ug 计，以国际标准品进行标定对照品：化学药品标准物质常称为对照品，除另有 规定外，均按干燥品或无水物进行计算后使用。（对照药材）、 （对照提取物）主要 为中药检验中使用的标准物 质。 （参考品）主要为生物制品检验中使用的标准物质7.ppm：百万分比 ppb：十亿分比8. 精确度药典规定取样量的准确度和试验精密度。 试验中供试品与 试药等“称重”或“量取“的量均以阿拉伯数码
4、表示，其精确度可根据数值的有效数位确定。如称取 “0.1g”系指称取重量可 为 0.060.14g；称取“2.00g”系指称取重量可为1.9952.005g；称取“2.0g”系指称取重量可为 1.952.05g.。即遵循“4 舍 6 入 5 成双”的原则。精密称定：称取重量应准确至所取重量的千分之一称定：称取重量应准确至所取重量的百分之一取用量为“约”若干时，指称取用量不得超 过规定量的10%恒重：除另有规定外，系指供试 品连续两次干燥或炽灼后的重量差异在 0.3mg 以下的重量按干燥品计算：除另有规定外， 应取未干燥的供试品进行试验 ，并将 计算中的取用量按检查项下测得的干燥失重扣除9样品标
5、准制定的原则：科学性、先进性、规范性、权威性10.药物鉴别试验一般选择 24 种不同类型的方法11. 药品检验工作的基本程序药品检验工作的基本程序一般分为（取样）、 （检验）、 （留样）、 （检验报告）第二章 药物的鉴别试验1. 一般鉴别试验：依据某一类药物的化学结构或理化性质，通过化学反应来鉴别药物的真伪。一般 鉴别试验只能证实某一类药物，而不能证实是哪一种 药物。2.紫外光谱鉴别法：21）测定最大吸收波长，或同时测 定最小吸收波长、 2）规定浓 度的供试液在最大吸收波长测定吸收度、3）规定吸收波长和吸收系数法、4）规定吸收波 长和吸收度比值法、 5）经化学 处理后, 测定其反应产物吸收光谱
6、特性3.色谱鉴别法HPLC 和 GC：供试品和对照品的 tR 一致 、 内标法： 供试品和对照品的 tR 与内标物 tR 比值相同第三章 药物的杂质检查1. 药物中杂质的来源：主要有两个来源，一是由生产过 程中引入；二是在贮存过程中受外界条件的影响2. 杂质的分类：A按其来源分为一般杂质和特殊杂质。B按照毒性分类分为毒性杂质和信号杂质C按照化学类别和特性分为：无机杂质、有机 杂质及残留溶剂4. 杂质的限量：指药物中所含杂质的最大允许量。通常用百分之几或百万分之几表示。公式:标准溶液的浓度标准溶液的体积杂质的限量（%）= 供试品的量100%其中杂质的限量用(L)表示，供试品的量用 S 表示， 标
7、准溶液的 浓度用 C 表示，标准溶液的体积用 V 表示。比较法：系指取供试品一定量依法检查，测定特定待检杂质 的参数（如吸光度等）与规定的限量比较，不得更大。注意在用吸光度法进行计算时运用公式时浓度的变化。A=ELC 在这里 C 的单位为 g/100ml。进行杂质浓度计算时要除 100，变为 g/ml.5. 薄层色谱（TCL）在药物杂质检查中的应用 杂质对照品法：适用于已知杂质并能制备杂质对照品的情况 杂质对照品与供试品溶液自身稀释对照法 供试品溶液自身稀释对照法 对照药物法6. 高效液相色谱法杂质检查的四种方法 外标法（杂质对照品法）：适用于有杂质对照品 加校正因子的主成分自身对照品法：适用
8、于已知杂质的控制 不加校正因子的主成分自身对照法：适用于没有杂质的对照品的情况 面积归一化法7. 三种热分析法： 热重分析法：TGA 差热分析法：DTA 差示扫描热分析：DSC8. 氯化物的检查 原理：药物中微量氯化物在硝酸酸性条件下与硝酸银反应，生成氯化银胶体微粒而显白色浑浊，与一定量的标准氯化钠溶液在相同的条件下产生的氯化银浑浊比较，判断供试品中氯化物是否符合限量的规定。 氯化物浓度以 50ml 中含 5080ug 的 Cl 为宜。若供 试品有颜色，可采用内消色法解决。 氯离子对人体无害，但能反映 药物的纯度及生产过程是否正常。氯化物常作为信号杂质检查。9. 铁盐检查法 ChP 和 USP
9、 采用硫氰酸盐法， BP 采用巯基醋酸 硫氰酸盐法用硫酸铁铵配制标准铁溶液 加入氧化剂过硫酸铵既可以氧化供试品中亚铁离子成铁离子，同时也可以防止由于光线使硫氰酸铁还原或褪色10. 重金属检查法有几种，各适用于什么 药物 硫代乙酰胺法A 原理：硫代乙酰胺在弱酸性条件下水解， 产生硫化氢，与重金属离子生成黄色到棕黑色的硫化物混悬液，3与一定量标准铅溶液经同法处理后所呈颜色比较，判定供试品中重金属是否符合限量规定。B 适用药物：溶于水、稀酸和乙醇的 药物 炽灼后的硫代乙酰胺法A 原理：重金属可能会与芳环、杂环形成较牢固的价键，需先将供试品灼烧破坏，残渣加硝酸进一步破坏，蒸干，加盐酸转化为易溶于水的
10、氯化物，再按第一法 进行检查B 适用药物：含芳环、杂环，以及难溶于水、稀酸及乙醇的有机药物C 温度越高，重金属损失越多，应控制炽灼温度在（500600）D 炽灼残渣加硝酸加热处理后，必 须（蒸干），除尽氧化氮 硫化钠法A 原理：在碱性介质中，以硫化 钠为显色剂，使 Pb 离子生成 PbS 微粒的混悬液，与一定 标准铅溶液经过同法处理后的所呈颜色比较，判断供 试品中重金属是否符合限量 规定B 适用药物：适用于溶于碱性水溶液而难溶于稀酸或在稀酸中即生成沉淀的药物11. 砷盐的 4 个检查法：古蔡氏法、二乙基二硫代氨基甲酸银法、白田道夫法、次磷酸法1 古蔡氏法a 原理：金属锌与酸作用产生新生态的氢，
11、与 药物中微量砷 盐反应生成具有挥发性的砷化氢；遇溴化汞试纸，产生黄色至棕色的砷斑，与一定量 标准砷溶液所生成的砷斑比 较，判断供试品中重金属是否符合限量的规定。b 试验中醋酸铅棉花作用：用来吸收可能产生的硫化氢气体，又可使砷化氢以适宜的速度通过c 锌粒的作用：与氯化亚锡在 Zn 表面形成 Zn-Sn 齐，起去极化作用，有利于氢气均匀连续发生。Zn 粒要通过 1 号筛，不然产生氢气太慢d 氯化亚锡和碘化钾的作用：还原剂。（2）. 二乙基二硫代氨基甲酸银法检砷A原理：金属锌与酸作用产生新生态氢，与微量砷 盐反应生成具有挥发性的砷， 还原二乙基二硫代氨基甲酸银，产生红色胶态银，同时在相同条件下使一
12、定量 标准砷溶液呈色，用目视比色法或在 510nm 波长处测定吸光度进行比较。12. 干燥失重测定方法：主要检查药物中水分及其他挥发性的杂质。常压恒温干燥法、减压干燥法与恒温减 压干燥法、干燥 剂干燥法。第四章 药物的含量测定方法与验证1.可供药物含量测定的分析方法主要包括（容量分析法）、 （光 谱分析法）、 （色谱分析法）2.高效液相色谱法在含量测定中的应用流动 相的 pH 应控制在 28 之间。最常用的 检测 器为紫外检测器。包括二极管 阵列检测器、有荧光检测器、蒸发光散射检测器、示差折光检测器、电化学检测器和质谱检测 器 系统适应性的四个指标：（色谱柱的理论板数 n）、（色谱峰的分离度
13、R）、（色谱系统的重复性）、 （色谱峰的拖尾因子 T） 测定法：内标法和外标法3.气相色谱法在含量测定中常用的固定液：甲基聚硅氧烷、不同比例组成的苯基甲基聚硅氧烷、聚乙二醇等4.样本分析的前处理方法： 不经 有机破坏的前 处理方法：水解法、还原法 经有机破坏的前处理方法：湿法破坏、干法破坏 干法破坏：本法主要适用于含卤素、 S、P 等有机药物定量分析的前处理，可分为高温炽灼法和氧瓶燃烧法氧瓶燃 烧法A 仪器装置：硬质玻璃锥形瓶、铂丝、燃 烧瓶B 吸收液的选择：含 F 药物一般选择茜素氟蓝比色法检查氟含量，使用本法进行有机破坏时，其燃烧产物为单一的氟化物，可以水为吸收液4采用银量法测定含氟药物含
14、量时，燃 烧产物亦为单 一的氟化氢，但氟化 氢在水中溶解度较低，需要水- 氢氧化钠溶液作为吸收液5.药品质量标准分析方法验证的八个指标准确度、精密度（包括重复性、中间精密度和重现性）、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性 准确度：指用 该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率（%）表示。准确度应在规定的范围内测试 精密度：指在规定的测试条件下，同一个均匀供 试品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度 重复性：在较短的时间间隔内，在相同的操作条件下，由同一分析人员连续测定所得结果的精密度称为重复性 中间精密度：在同一个 实验室内，由于实验室内部条件的改变，如不同时间由不同分
15、析人员用不同的设备测定所得结果之间的精密度 重现 性：在不同 实验室由不同的分析人员测定结果之间的精密度 检测 限一班以信噪比 S/N=3（或 2）时的相应浓度或注入仪器的量确定 LOD 值第五章 体内药物分析1.体内样品种类：血液、尿液、唾液、头发、脏器 组织、乳汁、精液、脑脊液、泪液、胆汁、胃液、胰液、淋巴液、 粪便等2.血样的三个种类血浆、血清、全血3.体内样品预处理方法里的去除蛋白质发有 4 种方法：溶剂提取法、中性盐析法、强酸沉淀法、热凝固法4. 体内样品预处理方法里的分离与浓集有 3 种方法液相萃取法、固相萃取法（SPE）、超滤法5.固相萃取法 原理： 操作步 骤：第六章 芳酸类非
16、甾体抗炎药物的分析1.阿司匹林具有邻羟基（游离或酯化）苯甲酸结构乙酰氨基酚具有苯胺和甲磺酰基结构2.水杨酸与三氯化铁试液反应显紫堇色3.双水杨酯与氢氧化钠试液煮沸后，水解生成水 杨酸钠与醋酸 钠，加稀 盐酸，即生成白色（水杨酸）沉淀4.S 鉴别：遇醋酸铅生成硫化铅黑色沉淀5.阿司匹林杂质：（游离水杨酸）和有关物质对乙酰氨基酚杂质：（对氨基酚）、 （对氯苯乙酰胺）第七章 苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析1.盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、盐酸去氧肾上腺素的特征化学反 应：双缩脲特征反应2.脂肪伯胺的专属反应：Rimini 反应3.肾上腺素的杂质：酮体4.含量测定的非水滴定法 一般来 说，当碱性药物的 pk
17、b 为 810 时，宜 选用冰醋酸作 为溶剂，碱性更弱Pkb 为 1012 时，宜选用冰醋酸与醋酐的混合溶液作为溶剂Pkb12 时， 应用醋酐作为溶剂 加入醋 酐应 防止氨基被乙酰化， 实验操作加冰醋酸溶解 样品后， 应在放冷的条件下加醋酸 （醋酸汞）消除氢卤酸的干扰，若碱性 较弱则加（醋酐）使突 跃明显第八章 对氨基苯甲酸和酰苯胺类局部麻药的分析1.盐酸普鲁卡因的鉴别方法5取本品，加水溶解，加氢氧化钠溶液，即生成白色沉淀（普鲁卡因），继续加热， 发生的蒸汽（部分普鲁卡因水解，生成溶于水的对氨基苯甲酸钠，以及 挥发的二乙氨基乙醇）能使湿 润的红色石蕊试纸变为蓝色， 热至油状物消失（全部水解，生成对氨基苯甲酸钠）后，放冷，析出白色沉淀（对氨基苯甲酸）2.盐酸普鲁卡因杂质：（对氨甲苯甲酸）3.亚硝酸钠滴定法 原理：芳伯胺基或水解后生成的芳伯胺基的药物在酸性溶液中与亚硝酸钠定量发生重氮化反应，生成重氮盐，可用永停滴定法指示反应终点注意事 项A 加入适量 KBr 加快反应速度：（增加被测溶液中 No+的浓度） 在不同无机酸体系中，重氮化反应速度不同。 氢溴酸盐酸 硝酸、硫酸B 加过量盐酸加速反应：（作用 简答题）重氮化反应速度加快、重氮盐 在酸性溶液中稳定、防止生成偶氮氨基化合物而影响测定结果C 反应温度：可在室温（1030）下进行，其中 15以下结果较准确D 滴定速度：先快后慢
