精选优质文档-倾情为你奉上121 蔗糖合成酶(SS)、蔗糖磷酸合成酶(SPS)活性参照於新建的方法并稍加改进。酶液提取：取0.5g左右预冷的水稻叶片(剪碎的去主叶脉的叶片)，加4 mL缓冲液A(50mmolL TrisHC1，pH 70、10 mmolL MgC12、2 mmolL EDTA-Na2、20 mmolL巯基乙醇、2 乙二醇)于预冷的研钵中冰浴快速研磨成糊状，倒入离心管中，在低温冷冻离心机上4 10000 rrmin离心30 min，所得上清液用于酶活性测定。SS活性的测定：在总体积0.15 mL的反应介质(含50 mmolL TrisHCL，pH7.0、10 mmolL MgC12, 10 mmolL果糖、3 mmolL UDPG)中，加入100uL酶液，30 水浴中反应10 min，加入2 molL NaOH 0.05mL，沸水煮10 min，流水冷却。再加入15 mL浓盐酸和05 mL 01 的间苯二酚，摇匀后置于80 水浴保温10 min，冷却后于480nm处比色测定蔗糖的生成。活
