测定细胞增值抑制率(共5页).docx

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精选优质文档-倾情为你奉上一、 试验原理MTT是一种粉末状化学试剂,全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,汉语化学名为 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名:噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶标仪在490nm波长处测定其光吸收值,在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。根据测得的吸光度值(OD值),来判断活细胞数量,OD值越大,细胞活性越强(如果是测药物毒性,则表示药物毒性越小)。二、 试验准备1. MTT 的配置MTT 一般最好现用现配,过滤后 4避光保存两周内有效,或配制成 5 mg/ml 保存在 -20长期保存,避免反复冻融。最好小剂量分装,用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光以免分解。可把 MTT 粉末称量分装在 EP 管里,用的时候

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