精选优质文档-倾情为你奉上实验二离子交换层析纯化兔血清 IgG 【原理】 DEAE-Sephadex A-50 （二乙氨基 - 乙基 - 葡萄糖凝胶 A-50 ）为弱碱性阴离子交换剂。用 NaOH 将 Cl - 型转变为 OH - 型后，可吸附酸性蛋白。血清中的 球蛋白属于中性蛋白（等电点为 pH6.85 7.5 ），其余均属酸性蛋白。 pH7.2 7.4 的环境中。酸性蛋白均被 DEAE-Sephadex A-50 吸附，只有 球蛋白便可在洗脱液中先流出，而其他蛋白则被吸附在柱上，从而便可分离获得纯化的 IgG 。 【试剂与器材】 1. DEAE-Sephadex A-50 2.0.5mol/L HCl 和 NaOH 3.0.1mol/L pH7.4 PBS 4.0.1mol/L Tris-HCl(pH7.4) 5.0.02 NaN 3 6.PEG 7. 无水乙醇 8. 紫外分光光度计 9.1cm20cm 玻璃层析柱 10. 自动部分收集器
