蛋白质含量测定方法汇总(共10页).doc

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精选优质文档-倾情为你奉上实验七蛋白质含量测定测定蛋白质的定量方法有很多,目前常用的有染料法,双缩脲(Biuret)法,酚试剂法(Lowry)法及紫外吸收法。目的要求1掌握测定蛋白质的含量基本方法。2了解染料法、双缩脲法、Lowry法和紫外吸收法测定原理。一、染料法实验原理在酸性溶液中染料考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合,此时考马斯亮蓝G-250颜色从红色变为蓝色,吸收高峰从460nm移至595nm。利用这个原理可以测定蛋白质含量。该法近年在某些方面有取代经典的Lowry法趋势,因为它操作简单,反应时间短,染料-蛋白质颜色稳定,抗干扰性强。本法的缺点是:对于那些与标准蛋白氨基酸组成有较大差异的蛋白质,有一定误差,因为不同的蛋白质与染料的结合是不同的,故该法适合测定与标准蛋白质氨基酸组成相近的蛋白质。器材吸量管; 试管;721型分光光度计试剂1.标准牛血清白蛋白溶液:配成0.1mg/ml的溶液。2.待测蛋白质溶液。3.染料溶液:称取考马斯亮蓝G-2500.1g溶于95%的酒精50ml

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