1、毕业论文 开题报告 生物 技术 青蛤不同地理居群的遗传多样性分析 1. 课题研究意义及国内外研究现状 研究意义: 青蛤,隶属软体动物门双壳纲,帘蛤目,帘蛤科,广泛分布于日本及中国大陆。通过对青蛤不同地理群体进行遗传多样性分析,可了解不同地理区域种群的遗传背景和遗传差异状况,以及这种遗传上的差异是否是这异域种群在生长速度成活率等生物学指标表现出差异的原因,对青蛤的种质资源的合理开发和保护及遗传改良都具有重要理论和现实意义。 研究现状: AFLP标记技术作为 20世纪 90年代初相对于 RAPD、 RFLP等技术的第二代分子标 记,已成为遗传学、生态学和进化研究的有力工具。应用 AFLP技术对青蛤
2、进行遗传分析。本研究对不同地区青蛤个体的遗传多样性进行 AFLP分析,为青蛤的育种选育提供理论依据。 2. 课题研究的主要内容、预期目标和研究方案 研究内容: 掌握 AFLP 技术:确定全基因组 DNA适宜的酶切、连接条件;建立稳定、高效的PCR 扩增体系和扩增条件;筛选出适合青蛤的 PCR 选择性引物;建立稳定的琼脂糖和聚丙烯酰胺电泳体系;掌握数据分析软件。 用 AFLP 技术分析 青蛤不同地理的遗传结构: 通过不同地理群体间的 AFLP 标记,分析不同地理群体间 的遗传结构差异性,研究表型性状与基因型之间的相关性,可望找出与生长性状相关的遗传标记,为分子辅助选择育种提供理论依据。 预期目标
3、: AFLP 技术的建立, 对青蛤不同地理群体间的遗传多样性研究,分析各个地理群体之间的遗传差异性,为种质鉴定和分子标记辅助育种提供理论依据。 研究方案: AFLP 标记技术体系的快速建立:初步掌握了实验流程和分析体系,建立稳定的AFLP 技术体系; AFLP 引物的筛选:查阅文献,参考其他贝类中扩增效果较好的引物,先粗略筛选,以缩短筛选时间和降低成本,然后通过反复试验筛选最佳引物; 青蛤不 同地理群体 的 AFLP标记分析: 采集选育 4 个 群体 个体各 30 枚,活体解剖,用闭壳肌提取 DNA, AFLP 标记技术分析不同 地理群体间 的遗传差异,用于选种效果评价和分子标记辅助育种 。
4、3. 课题进度计划 2010.9.15 2010.10.30 :完成毕业论文选题,接受任务书,系统查找、收集相关资料,完成实验计划和方案; 2010.11.1 2011.1.20 : 申请实验教室、实验用品和相关试剂开始进行实验,记录关键性的实验步骤和实验数据; 2011.1.21 2011.2.25: 数据的整理以及完成论文初稿。 4. 参考文献 1 陈省平 ,包振民 ,潘洁 ,等 .4 种养殖扇贝的群体遗传多样性及特异性 AFLP 标记研究 J.海洋学报 ,2005,27(2):160-164. 2 赫崇波 , 丛林林 , 葛陇利等 .文蛤养殖群体和野生群体遗传多样性的 AFLP 分析 J
5、.中国水产科学 ,2008,15(2):215-221. 3 韩志强 ,高天翔 ,王志勇等 .黄姑鱼群体遗传多样性的 AFLP 分析 J.水产学报 ,2006,30(5):640-646. 4 王伟继 ,岳志芹 ,孔杰等 .AFLP 分子标记技术的发展及其在海洋生物中的应用 J.海洋水产研究 ,2005,26(1):80-85. 5 AARSHJM, VANLAJT, KEIJERJ. High-resolution genotyping of Salmonella strains by AFLP-finger printing J.Letters in Applied Microbiology, 1998, 26:131-135. 6 AJMON-MARSANP, VALENTINIA, CASSANDROM, et al. AFLPTM markers for DNA fingerprinting in cattle J.Animal Genetics, 1997, 128:418-426.