基因工程复习总结(共12页).docx

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精选优质文档-倾情为你奉上思考题第二章 分子克隆工具酶1简述基因工程研究用的工具酶的类型和作用特点。2.说明限制性内切核酸酶命名原则(举例)。3.限制内切核酸酶的星活性是指什么?在极端非标准条件下,限制酶能切割与识别序列相似的序列,这个改变的特殊性称星星活性。星星活性是限制性内切酶的一般性质,任何一种限制酶在极端非标准条件下都能切割非典型位点。引起星星活性的因素:甘油浓度高(5%),酶过量 (100U/ml),离子强度低(8.0),或是加了有机溶剂如DMSO(二甲基亚砜)、乙醇、乙二醇、二甲基乙酰胺、二甲基 甲酰胺,或是用其它2价阳离子如Mn2+、Cu2+、Co2+ 或Zn2+代替了Mg2+。4.T4 DNA ligase 和 E.coli ligase 有什么异同?5.连接酶的反应温度如何选择,为什么?连接酶最适的反应温度应是37 ,但在这一温度下粘性末端的氢键结合不稳定,因此连接反应常采用的最佳温度一般在4-16间,通常多选用12-16 30分钟到16小时。

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