感受态细胞的制备(DH5α大肠杆菌)(共3页).doc

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精选优质文档-倾情为你奉上感受态细胞的制备(DH5)一、 准备工作所有试剂、容器均需提前预冷。1、实验器械4离心机(50ml离心管),37恒温箱,37摇床,超净台(使用前需要紫外消毒15min至少);0.22m的滤器2个(过滤灭菌TfB2种溶液),10ml注射器2个;冰盒;高压灭菌的1.5mlEP管1盒,与离心机配套的50ml离心管6个(高压灭菌),高压灭菌的500ml锥形瓶2个,高压灭菌的100ml玻璃瓶2个,高压灭菌的1ml枪头和200l枪头各一盒。2、试剂配制(甘油特别难吸,用蓝枪头慢慢吸吧) LB平板:单纯LB平板,加有amp或有kana的(制板时需标注好类型,时间)。 SOB培养基(Super Optimal Broth) TfB:(100ml制备量)分别称取乙酸钾0.294g,MnCl2 0.99g,KCl 0.146g,CaCl2 0.111g,置于200ml烧杯中,加入15ml甘油和85mlDDW,摇晃,使其全部溶解。然后在安全橱中用孔径为0.22m的滤器过滤混合液,置于高压灭菌的100ml

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