汉恒生物无缝克隆引物快速设计教程(共11页).docx

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精选优质文档-倾情为你奉上汉恒生物基于Gibson Assembly的无缝克隆快速设计教程软件:Genome Compiler设计举例:把LacZ克隆到pEGFP-N3中,得pLacZ-EGFP难点:LacZ需要和EGFP融合表达,所以克隆位点的选择尤其关键!注:Snapgene也可以设计,容后开篇介绍。1. 下载pEGFP-N3的载体文件。我们推荐从Snapgen网站下载。导入到Genome compiler中(如图1)。LacZ序列软件本身就有,可以搜索得到。 图12. 点击File-new construction project, 再点击下面的Gibson Assembly进入(图2)。图23. 把Backbone pEGFP-N3拖入,载体信息会完全展示出来,包括序列、图谱和各种注释(图3-4)。点击sequence和circular可以在质粒的序列和图谱之间切换,方便查看。图4所示的是我们选中对多克隆位点MCS的序列展示。 图3图44. 图4之间有一些选项:快速克隆首先需要对载体进行线性化处理。

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