定量PCR加样操作流程(共2页).doc

上传人:晟*** 文档编号:8020838 上传时间:2021-11-16 格式:DOC 页数:2 大小:24KB
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精选优质文档-倾情为你奉上QPS-201加样流程和Step One Plus仪器的仪器操作要准备的东西:1. 八排管和盖子2. 96孔细胞培养板3. 移液器:10ul,20ul,100ul,200ul。4. 枪头10ul,20ul,100ul,200ul或者300ul。5. 200ul和600ul的PCR管。6. 试剂:QPk-201,上下游引物,cDNA,去RNA酶的PCR水7. 注意事项:A.引物的储存浓度100nm,工作浓度:5-10nmol,引物要过量,上下游引物要先混匀在一起,然后再加。内参actin和目标基因的引物都要混匀。混匀后的引物可用半个月,用时要反复混匀,水样的东西混20下,油状的(酶)东西至少要混30下。B.试剂配总管用,cDNA和酶mix配一管,引物和水配一管。混匀之后,再分别加到管子里。为什么试剂要配总管呢?cDNA模板量很少,所以加多加少对实验影响很大,酶加10ul,样多,少量的东西要想混匀,必须放在大量的东西里这样再去混匀,就可以使每个管子里的样品都能保证是一致的。C.内参和目标基因都要跑3个复孔,取

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