菌种甘油保存(共1页).docx

精选优质文档-倾情为你奉上菌种甘油保存1、配制30%甘油，121摄氏度高压灭菌20min，常温保存既可，一般都是现配现用2、将要保存菌种接种于LB（或带相应抗性）液体培养至对数生长期（肉眼见培养体系内浑浊即可）3、无菌条件下将菌液与30%浓度甘油1:1等体积混合于离心管中，甘油终浓度为15%4、再次使用前置冰浴融化后接种到固体培养基上即可5、一般零下20度一年左右，零下80度二年以上，时间太长就使用前活化下甘油保菌原理1、冷冻保存时菌液会被冻起来，内部产生的“冰晶”会使细胞破裂等，加入如甘油后可以防止对细胞的伤害。2、简单来说就是抗冻，原理是甘油能够提高水体的粘稠度，使其冰点提高，防止细胞内部产生冰晶造成细胞的损害，一般使用甘油的终浓度在10%-20%，该范围外的浓度会对细胞产生毒性，质粒会很容易丢失3、高浓度甘油保存菌种据说会影响菌种的表达活性 如果该菌只用一次 怎么化都没关系的 甘油浓度太高，质粒就很容易丢失专心-专注-专业