1、毕业论文开题报告 生物工程 中华鳖肌肉 DNA 提取方法比较研究 1课题研究意义及国内外研究现状 中 华鳖也是我国重要的出口创汇 水产品 ,输往国家和地区有日本, 香港 、澳门。出口口岸: 山东 、湖南、广东、 天津 。 近 20 年来,中华鳖在中国的养殖业得到了长足发展,养殖产量居世界之首, 但由于种质保护意识与技术的缺乏,大量境外走私鳖涌入中国,中华鳖种质出现退化、品种混杂等现象,极大地限制和影响了中华鳖养殖业的可持续发展。由此有必要开展中华鳖不同区域群体的 DNA采集得到高质量的 DNA用于中华鳖的相关生物学研究。如种质资源分子鉴定、基因组甲基化研究等。 本文将中华鳖组织粉末 DNA提取
2、方法进行了比较研究,以获得最佳的 DNA提取方法,为后续研究打下基础。主要通过对广泛使用的 DNA提取方法,如 CTAB法,改进的 CTAB法, SDS 法和 CTAB-SDS 法提取出的 DNA进行定性和定量分析,总结出 最佳提取方法。 2.课题研究的主要内容、预期目标和研究方案 主要内容 : ( 1) 将中华鳖的肌肉组织制成粉末以供提取 DNA。 ( 2) 用不同的方法进行 DNA的提取 。 ( 3)采用 0.8的琼脂糖凝胶电泳 对 DNA样品进行 测定 , 280 nm和 260 nm 处的吸光度比值 进行定量分析。 预期目标: ( 1) 比较 不同 DNA提取方法提取的 DNA的 差异
3、, 获得最佳的 DNA提取方法 。 ( 2) 撰写毕业论文。 研究方案: 3 课题进度计划 对中华鳖进行解剖取肌肉组织 对肌肉组织进行干燥、粉碎处理 用不同的 方法进行 DNA提取 用琼脂糖凝胶电泳和吸光值检查 对电泳图和吸光值进行比较分析得出最佳 DNA提取方法 2011 年 8 月:收集相关资料,熟悉实验 步骤; 2011 年 9 月至 2011 年 10 月:实验准备,并对样品进行处理,开展预备实验; 2011 年 11 月至 2012 年 2 月:开展实验, 用多种 DNA提取方法提取 DNA,进行定性和定量检测 比较 不同方法提取的 DNA,得到最佳方法 ; 2012 年 3 月至
4、2012 年 4 月:完成实验资料的整理、论文撰写与修改 及论文答辩 。 4 参考文献 1 汪永庆 ,王新国 ,徐表祥 ,等 .一种动物基因组 DNA 提取方法的改进 J.动物学杂志 ,2001(1):14-22. 2 刘波 ,郑哲民 ,张迎春 ,等 .稻蝗属基因组 DNA 提取方法 J.陕西师范大 学学报 ,1999,27(3):97-99. 3 李淑萍 ,徐亚军 .蚂蚁基因组 DNA 提取方法比较 J.江苏农业科学 ,2010(1):50-51. 4 马洪雨 ,姜运良 ,岳永生 ,等 .一种从鱼类肌肉组织中提取基因组 DNA的简易方法 J.生物技术通讯 ,2005,(5):531-532.
5、 5 王义权 ,周开亚 ,徐珞珊 ,等 .不同固定剂保存动物组织标本对 RAPD 反应的影响 J.动物学杂志 ,1999,34(1):33-37. 6 Hong C, Murugesan R, Sek Y T et al. Evaluation of five methods for total DNA extraction from Western corn rootworm beetlesJ. PLoS One, 2010, 5(8): 11-63. 7 严海燕 ,丁益 ,吴元喜 .基因工程与分子生物学实验教程 M.武汉大学出版社 ,2009. 8 张宁 ,王凤山 .DNA提取方法进展 J.中国海洋药物杂志 ,2004,98(2):40-46.