精选优质文档-倾情为你奉上实验 纤维素酶活力的测定(3,5-二硝基水杨酸法)一、实验目的掌握还原糖的测定原理,学习用3,5-二硝基水杨酸法测定纤维素酶活力的方法。 二、实验原理纤维素酶水解纤维素,产生纤维二糖、葡萄糖等还原糖,能将3,5-二硝基水杨酸中的硝基还原成橙黄色的氨基化合物,故可利用比色法测定其还原物生成量来表示纤维素酶的活力。三、主要仪器与试剂(一)实验仪器1. 25mL比色管 2. 722型分光光度计 3. 滴管 4.水浴锅 5.移液枪 6.电炉(二)、试剂1. 3,5-二硝基水杨酸显色液:称取10.0 g 3,5-二硝基水杨酸,溶入200mL蒸馏水中,加入20g分析纯氢氧化钠,200g酒石酸钾钠,加水至500mL,升温溶解后,加入重蒸苯酚2.0g,无水亚硫酸钠0.50g。加热搅拌,待全溶后冷却,定容至1000mL。存于棕色瓶中,放置一周后使用。2. 0.1mol/L pH4.5乙酸-乙酸钠缓冲溶液。3. 0.5%羧甲基纤维素钠水溶液,溶解后成胶状液,静置过夜。使用前摇匀。4. 葡