蛋白提取方法(共4页).doc

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资源描述

精选优质文档-倾情为你奉上1 材料和方法 1.1 材料 1.1.1 组织和细胞的来源: 1.1.2 仪器设备 机械组织匀浆器 低温高速离心机 (40,000 g) 超速离心机 超生细胞破碎仪 超纯水装置 1.1.3 试剂 三氯醋酸 (TCA) 丙酮 二硫苏糖醇 (DTT) 尿素 CHAPS PMSF EDTA 乙醇 磷酸 考马斯亮蓝R350 抑肽素A 亮肽素 试剂纯度均应是分析纯或以上。1.1.4 溶液配制 (1) PBS: NaCl 8 g, KCl 0.2 g, Na2HPO4 1.44 g, KH2PO4,溶于800 ml水中,用HCl调pH至7.4,用纯水定容至1 L; (2) EDTA 储存液: 18.61 g Na2EDTA2H2O,溶于70 ml纯水中,用10 mol/L NaOH调节pH值至8.0 (约需2 g NaOH颗粒),定容为100 ml。可高压灭菌后分装备用; (3) 亮肽素储存液 (50 g/ml,100) 10 mg/ml溶于水,-75保存;使用时配成50 g/ml

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