1、毕业论文任务书 环境科学 温度对恶臭假单胞菌生物学特性的影响 一、主要任务与目标： 恶臭假单胞菌属条件性致病菌，其致病性主要取决于宿主的生理状态及水环境的理化条件。恶臭假单胞菌能够引起的多种水 产动物疾病，导致水产养殖量减少，经济不断下滑。 目前对于恶臭假单胞菌的研究主要集中在对重金属的吸附，环境生物修复等方面而有关温度对恶臭假单胞菌生物学特性方面的影响尚知之甚少。本研究开展培养温度对恶臭假单胞菌生物学特性的影响研究，包括不同培养温度下产酶特性、外膜蛋白种类、脂多糖特性等，为阐明恶臭假单胞菌不同温度条件下的致病机理提供部分基础。预期目标：不同温度下酶的产生种类不同；不同温度下提取的外膜蛋白含量
2、不同，随温度的增大产量增加，所对应的高分子量外膜蛋白条带增多；不同温度下粗提脂多糖中外膜蛋白含量随培养温度 的升高呈增多的趋势，不同温度下谱带存在差异。 二、主要内容与基本要求： 1、 不同温度下产酶特性研究：选取 5个不同温度 4/15/20/25/30 进行培养，测定不同培养温度下胞外及胞内产物的产酶特性，包括淀粉酶、蛋白酶、磷脂酶等。 2、 不同培养温度下菌株生物膜形成特性：以银染法检测。 3、 不同培养温度下外膜蛋白组成的比较：以十二烷基肌氨酸 Sarkosyl法提取菌株外膜蛋白，进行聚丙烯酰胺凝胶电泳 SDS-PAGE，检测主要条带的差异。 4、 不同培养温度下菌体脂多糖的差异：采用
3、酚水法提取脂多糖， SDS-PAGE后银染，检测分子量和主要条带的差异。 三、计划进度： 1、 2011.10 2011.11，不同温度下产酶特性研究； 2、 2011.12 2012.1，不同培养温度下外膜蛋白组成的比较； 3、 2011.12 2012.1，不同培养温度下菌体脂多糖的差异； 4、 2012.3 2012.4，总结报告的撰写和结题。 四、主要参考文献： 1毛芝娟 ,刘国勇 ,陈昌福 .大黄鱼溃疡病致病菌的初步分离与鉴定 J.安徽农业大学学报 .2002,29(2):178-181. 2 樊 海 平 . 恶 臭 假 单 胞 菌 引 起 的 欧 洲 鳗 鲡 烂 鳃 病 J. 水产学报 .2001(2):147-150. 3陈志英 ,王磊 ,周琪 .菌龄对恶臭假单胞菌吸附铜离子能力的影响 J.中国环境科学 . 2006,26:97-101. 4ReinekeW. Development of hybrid strains for the mineralization of chloroaromatics by patchwork assembly. Annu Rev Microio,1998, 52: 287-331. 5徐燕 .恶臭假单胞菌的应用 研究简介 J.微生物学通报 .2010,4-6.
