1、毕业论文任务书 环境科学 温度对荧光假单胞菌生物学特性的影响 一、主要任务与目标: 荧光假单胞菌是属于革兰氏阴性嗜冷菌,这种类型的细菌在 4 生长,高于30 生长不好, 37 一般不生长。但也有部 分荧光假单胞菌可以在 37 生长,往往成为临床上的机会性病原。荧光假单胞菌可以产生蛋白酶、酯酶和磷脂酶等胞外酶,其产酶特性及其细胞结构成分如外膜蛋白种类和脂多糖结构等均受生长温度的影响;该菌对宿主细胞的粘附性、细胞毒性作用也受到培养温度的影响。本实验旨在为控制该菌的污染或感染提供部分基础。 二、主要内容与基本要求: 1,胞内产物的酶活性分析:提取 4 、 15 、 20 、 25 、 30 培养的荧
2、光假单胞菌的胞内产物,用杯碟法测定不同培养温度下细菌的产酶特性; 2,菌株的胞外酶活性分析:用特定培养基的方法对不同培 养温度下的菌株进行胞外酶活性分析; 3,不同温度下外膜蛋白 OMP和脂多糖 LPS的含量比较:先对 30 、 22 、 15 培养的 1.1823提取 OMP和 LPS。再用 Bradford法比较各个温度下 OMP和 LPS的含量; 4, SDS-PAGE凝胶电泳检测不同培养温度的 OMP及 LPS:提取的不同温度下粗OMP和粗 LPS采用解离非连续缓冲系统垂直板电泳( SDS-PAGE)和银染法进行分析。 三、计划进度: 1, 2011年 6月 -7月, 查找相关资料 3
3、, 2011年 9月 -12月, 实验研究温度对荧光假单胞菌生物学特 性的影响 4, 2012年 1月 -4月, 完成论文 5, 2012年 4月 26号, 论文答辩。 四、主要参考文献: 1吴谋胜 , 王三英 , 彭宣宪 . 温度对嗜水气单胞菌蛋白质表达的影响 .厦门大学生命科学学院 , 2002(26):5. 2胡靖 , 李爱华 , 胡成珏等 . 温度和 pH值对嗜水气单胞菌毒力基因表达的影响 . 南京理工大学学报 , 2006,6(30):3. 3 N. Orange. Growth temperature regulates the induction of p4actamase in
4、 Pseudornonas fluorescens through modulation of the outer membrane permeation of a p4actam-inducing antibiotic. MiCrObiohgy, 1994, 140, 3125-3130. 4 Daniel H.Hug and John K.Hunter. Effect of Temperature on Histidine Ammonia-Lyase from a Psychrophile, Pseudomonas putida.Journalof Bacreriology, 1974, 92-97. 5 Weller D M.Biological. control of soilborne plant pathogens in the rhizosphere with bacteriaJ. Annu Rev Phytopathol, 1988,26:379-407.