1、KTApurifier 层析仪使用操作规程1、 开机打开仪器的主电源,打开电脑电源。仪器开始自检,自检完成后(CU950 上面的3 个指示灯完全点亮并不闪烁)。双击桌面上 UNICORN 图标,进入操作界面。2、 准备工作溶液和样品所有的工作溶液和样品必须经过 0.45m 的滤膜过滤(样品也可高速离心后取上清备用)。当缓冲液中含有有机溶剂(如乙腈、甲醇),需在使用前用低频超声脱气10min。3、 泵清洗及管道准备:首先将 A1 管道放入缓冲液(或平衡液,bangding buffering)中,将 B1 管道放入高盐溶液中(或 elution buffering),在 system contr
2、ol 窗口点击工具栏内的manual,选择 pumppump wash purifier,选中 A1,B1 管道为 ON, execute。4、 安装层析柱:泵清洗结束后,选择 pumpflow rate,输入流速 1ml/ml,insert;选择Alarm&monalarm pressure,设置 high alarm(输入填料的耐受压力,可在填料说明书中查到),insert,execute。先拧开柱子上端的堵头,将 injectionValve 的 1号位管道接入柱头,稍微拧紧后将柱下端的堵头卸掉接入管道,操作过程防止气泡进入。(如果是长柱子需要加长管道)。5、 开始纯化:1) 柱子接入后
3、,缓冲液已经开始平衡柱子,待柱子平衡好了(观察电导COND,pH 的数值和变化趋势)就准备上样了。此时将紫外调零,选择Alarm&monautozero,exectue。2) 量样品用样品环上:将预处理好的样品吸进注射器,去除气泡,从injectionValve 的 3 号位推入(进样量不得低于样品环的体积)推好后保留注射器在 3 号位上。选择 flowpathinjectionValveinject,execute。大量样品用系统泵上样:点击 pause,将 A1 放入样品中,点击 countine,待样品上完后,再换进缓冲液清洗柱子。3) 清洗完成后,开始上盐梯度,选择 pumpgradi
4、ent,按照自己的工艺选择targetB 和 length。4) 脱开始后,如果要收集峰,选择 Fracpeak_frac parametersUVslope(或level),insert;Fracpeak_fractionation,输入每管最多收集体积,insert,exectue。结束峰收集选择 FracPeak_fracstop_900,execute。如果想固定体积收集,选择 Fracfractionation_900,输入每管收集体积,exectue。结束固定体积收集选择 Fracfractionation_stop_900。5) 工作结束,将 A1 和 B1 入口放入纯水中,启动 pump wash purifier 功能冲洗A 泵和 B 泵及整个管路。然后再将 A1 和 B1 入口放入 20乙醇中,同样操作将乙醇冲满整个管路保存。6、 卸下层析柱:系统给柱子一个慢流速,设置系统保护压力,然后先拆柱子的下端,正在滴水的时候将堵头拧上,再拆柱子的上端,最后拧上上端的堵头。整个过程防止气泡进入。7、 关闭电源:从软件控制系统的第一个窗口 unicorn manager 统一退出,其他窗口不能单独关闭。然后关闭 AKTA 主机电源,关闭电脑电源。(仪器的维护另见系统维护指南)通用电气医疗集团生命科学部hotline:8008109118 web: