细胞传代标准化步骤(共1页).doc

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精选优质文档-倾情为你奉上细胞传代标准化流程: 穿戴好白大褂和手套,用75%酒精擦手;1、 取出细胞,显微镜下观察细胞形态和密度,确定细胞生长状况,是否需要传代或换液;2、 将培养基(如有需要还有血清和大瓶高糖培养基)、PBS、胰酶培养基等预热及超净台消毒结束后,将试剂及细胞等喷酒精后移入超净台,将废液缸喷足酒精移入超净台,取酒精棉放入超净台;3、 点燃酒精灯,将瓶口拧松,过火消毒;4、 在确定细胞生长状况良好且没有污染的情况下,将培养皿中的培养基取(大培养皿6ml, 中培养皿3ml)至一个新的15ml离心管中;(一个1ml枪头)5、 用适量PBS清洗细胞表面(大皿5ml,中皿3ml),并弃去PBS;(一个5ml枪头)6、 加入适量胰酶消化细胞(大皿1ml,中皿0.5ml),此时可将细胞置于37C细胞培养箱内消化;(C2C12用5min,3T3-L1用1.5min),(一个1ml枪头)7、 待消化完全后,用胰酶6倍体积的完全培养基中止消化,并吹打培养皿皿底,将细胞移入离心管;(一个5ml枪头)8、 1000rpm,5min离

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