细胞周期的流式检测方法(共4页).doc

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精选优质文档-倾情为你奉上细胞周期的流式检测方法细胞周期(cell cycle)是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程,分为G0/G1期、S期、G2/M期。在科研实践中,很多实验具有对细胞群体的周期分布进行检测的需求。细胞群体周期测定的方法有很多种,最常用的是PI(碘化丙啶)渗入DNA进行染色,然后通过流式细胞仪检测PI从而测定细胞群体的周期分布。因此,下面笔者主要通过BD(BectonDickinson)公司生产的BD FACSCalibur流式细胞仪测定PI标记的细胞群体为例,对细胞周期的流式检测方法进行阐述。1、 PI染色步骤概略1、单细胞悬液离心,1500rpm , 5min,弃上清。2、PBS 1ml离心,弃上清。3、70%酒精2ml,4,30min,离心,弃上清液。4、PBS 1ml离心,弃上清。5、RNase A的PBS溶液 (20ug/ml),500ul,37,30min,离心弃上清。6、PBS 1ml离心,弃上清。 7、PI的PBS溶液(50ug/ml),500ul,室温避光孵育30min。

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