ELLMAN试剂法测定自由巯基和二硫键(共6页).doc

精选优质文档-倾情为你奉上ELLMAN试剂测定自由巯基试验基于的原理：5,5-dithiobis-2-nitrobenzoic acid (DTNB) 5,5-二硫基-双(2-硝基苯甲酸)5,5-二硫基-双(2-硝基苯甲酸)(DTNB)在412nm没有吸收，与巯基反应后，生成2-硝基-5-巯基苯甲酸（TNB）1。TNB2-在412nm有很强的吸收，可以用于对肽段的自由巯基进行定量分析2。 DTNB TNB2- 根据文献记载，TNB的吸光系数在13.6*103M-cm-14.25*103M-cm-之间3,4。吸光度测量的最灵敏范围在0.2-0.7之间。A=bc，其中A为吸光度，是摩尔吸收光系数或消光系数，单位为升/（摩尔厘米）L/(molcm）。以吸光度下限0.2来计算（吸光系数取14.15*103M-cm-），需要TNB的浓度为c=0.2/（14.15*103LM-cm-*1cm）=1.4*10-