流式细胞仪使用方案(共5页).doc

精选优质文档-倾情为你奉上流式细胞仪使用方案一、 单细胞悬液的制备贴壁细胞0.25%胰蛋白酶消化2至3min移至玻璃离心管加入D-hanks液，轻轻吹打用800-1000r/min离心机离心3至5min去上清，加入PBS均匀吹打，短时低速离心。重复三次加PBS充分吹打，保证细胞数每毫升1万个作用加95%乙醇（1：10），固定30min4度冰箱过夜或-20度长时保存二、 染色技术1选取荧光素2样品染色步骤PBS洗细胞1-2次加荧光单抗，暗处孵育15-30min如果必需，加荧光二抗，暗处孵育15-30minPBS洗细胞一次过300目尼龙网上机检测3对照的设置阴性对照同型对照（见附录）三、 流式细胞数据处理与分析数据的显示通常可分为一维单参数直方图（histogramplot）、二维点图（dotplot）、二维等高图（contour）和假三维图（pseudo3D）等。下面简述最常用的