引物稀释方法(共1页).docx

精选优质文档-倾情为你奉上引物稀释方法PCR引物稀释方法（-S为上游引物,-A为下游引物）：1. 按照管壁上的nmol数加入10倍的灭过菌的纯化水稀释成100nmol/mL2. 各取上游引物（*-S）10uL，下游引物10uL加入到80uL灭过菌的纯化水中稀释成10nmol/mL3. 取稀释好的引物混合液2uL做PCR（25uL体系）定量PCR操作步骤参考（以FastStart Universal SYBR Green Master(Rox) Roche为例）1）取0.2ml PCR管，配制如下反应体系 2 qPCR Mix12.5l7.5M基因引物2.0l反转录产物2.5lddH2O8.0l2）PCR扩增预变性95，10min循环（40次）95，15s60，60s末段延伸60，5min溶解曲线7595，每20s升温1专心-专注-专业