精选优质文档-倾情为你奉上聚合酶链式反应扩增DNA【实验目的】熟悉通过聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，简称PCR）体外扩增特定DNA-片段的技术原理和实验方法。【实验原理】PCR是在模板DNA、引物和4种脱氧核苷三磷酸（dNTP）存在的条件下，依赖于DNA聚合酶的酶促DNA合成反应。反应分为三步：（1）变性（denaturation）: 双链DNA在高温条件下解开成单链；（2）退火（annealing）:当温度降低时，引物与单链模板DNA 的特定序列结合；（3）延伸（extension）: DNA聚合酶以单链DNA为模板，按照碱基互补配对原则，从引物的3端按照53方向合成新链。以上述三步为一个循环，每个循环合成的DNA都可作为下一个循环的模板，经过多个循环后，特定的DNA-片段数量可以增加到2n倍。本实验根据噬夏孢欧文氏菌（Erwinia uredovora）基因组中的crtE序列（crtE编码牻牛儿基牻牛儿焦磷酸合成酶，参与类胡萝卜素的合成），设计一对引物，从基因组中扩增该基因。【器材与试剂】
