血清清蛋白、γ-球蛋白的分离、提纯与鉴定(共10页).doc

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精选优质文档-倾情为你奉上血清清蛋白、-球蛋白的分离、提纯与鉴定一、实验目的1. 掌握盐析法、凝胶层析法、离子交换层析法分离蛋白质的原理和基本方法;2. 掌握醋酸纤维素薄膜电泳法的原理和基本方法;3. 了解柱层析技术。二、实验原理血清蛋白主要由清蛋白和球蛋白组成,各行使其重要的功能。 本实验利用盐析方法将血清中的清蛋白和球蛋白分离,并用电泳技术观察蛋白质分离教果。1盐析蛋白质分子能稳定存在于水溶液中是因为有两个稳定因素:表面的电荷和水化膜。当维持蛋白质的稳定因素破坏时,蛋白质分子可相互聚集沉淀而析出,蛋白质分子沉淀析出的方法很多,根据对蛋白质稳定因素破坏的不同有中性盐析法、有机溶溶剂法、重金属盐法以及生物碱试剂法等。盐析法的原理是:中性盐如硫酸铵(NH)SO4)等对蛋白质作用破坏了蛋白质表面水化膜,并且中和了部分电荷,从而使蛋白质相互聚集而析出。由于血清中各种蛋白质分子的颗粒大小、所带电荷的多少和亲水程度不同,故盐析所需的盐浓度也不同,因此调节盐的浓度可使不同的蛋白质沉淀从而达到分离的目的。血清球蛋白在半饱和状态下发生沉淀,

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