α-葡萄糖苷酶抑制活性的测定方法(共3页).doc

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精选优质文档-倾情为你奉上2.2实验方法2.2.1-葡萄糖苷酶抑制活性的测定方法2.2.1.1 反应溶液的制备 (1)配制底物PNPG溶液:精确称取 0.3766gPNPG,加适量0.1mol/L磷酸缓冲液(pH为6.8)溶解,再用容量瓶准确定容到50mL,配制成25mmol/L的母液。将母液分别稀释成0.1、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mmol/L7个不同梯度的标准品溶液,备用。 (2)配制-葡萄糖苷酶的酶溶液:将冻干酶粉(酶活力为14u/mg)用0.01mol/L磷酸缓冲液(pH为6.8)溶解,配制成2u/mL的母液。再将酶液分别稀释,配制成0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、1.0u/mL的酶溶液,备用。 (3)配制DNJ标准溶液(抑制剂):精确称取 0.0010g DNJ 标准品,用容量瓶准确定容到10mL,配制成1000g/mL DNJ标准母液。将母液分别稀释成、1、5、10、20、40、60g/mL六个不同梯度的标准品溶液,备用。 (6)0.2mol/L的 Na2CO3:称取2.16g Na2

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