第一链cDNA合成(反转录)(共2页).docx

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精选优质文档-倾情为你奉上cDNA合成一. 普通cDNA合成普通cDNA第一链合成使用Fast Quant RT Kit(TIANGEN),具体如下:1. Microtube 管中配制下列模板 RNA/引物混合液,全量 2.5 l;试剂名称使用量(2.5ul体系)Total RNA500ng5*gDNA Buffer0.5ulRNase free dH2Oup to 2.5 l2. PCR仪中42保温 3 分钟后迅速在4度急冷 2 分钟以上;3. 在上述 Microtube 管中配制下列反转录反应液Mix2.5ul;试剂名称总量(2.5ul)10*Fast RT Bufffer0.5 lRT Enzyme Mix0.25 lFQ-RT Primer Mix0.5 lRNase free dH2Oup to 2.5 l4将反转录中反应中的Mix,加到gDNA 去除步骤的反应中,充分混匀,总体系5ul。5. 42孵育15Min。6. 95度孵育3min后放于

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