精选优质文档-倾情为你奉上【试剂与仪器】 1 小牛血清。2 双抗溶液（链霉素 100g+ 青霉素 100 单位）。3 DMEM 培养基。4 转染试剂（ LIPOFECTAMINE 2000 ）。5 细胞培养基（ DMEM+10%NCS ）。6 PBS 。7 无血清培养基。8 胰酶（ Trypsin ）。9 培养皿，移液管，量筒，恒温水浴箱，离心机， 15ml 离心管，微量移液器，荧光显微镜和 CCD 。【操作步骤】 1 转染前一天，胰酶消化细胞并计数，细胞铺板，使其在转染日密度为 90% 。细胞铺板在 0.5ml 含血清，不含抗生素的正常生长的培养基中。2. 对于每孔细胞，使用 50l 无血清 DMEM 培养基稀释 0.8g-1.0g DNA 。多孔操作可以批量制备。3. 对于每孔细胞，使用 50l DMEM 培养基稀释 1l-3l LIPOFECTAMINE 2000 试剂。 LIPOFECTAMINE 2000 稀释后，在 5 分钟内同稀释的 DNA 混合。保温时间过长会降低活性。
