基因工程实验报告的实验步骤(共4页).doc

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精选优质文档-倾情为你奉上实验一:大肠杆菌DH5和BL21感受态细胞的制备【实验步骤】1 从LB平板上挑取新活化的大肠杆菌DH5单菌落,接种到5mL LB培养基中,37振荡培养过夜。2 取1mL培养物接种到100mL LB培养基(250mL三角瓶)中,37振荡培养23h。3 将菌液转移到50mL离心管(2管)中,冰上放置15min。4 4 4000 rpm 离心5min,弃去上清液,倒置使培养液流尽。5 用20 mL 冷CaCl2溶液悬浮菌体沉淀合并成一管,在4 4000 rpm 离心5min,弃去上清液。6 用10 mL 冷CaCl2溶液悬浮菌体沉淀,冰浴30min。7 4 4000 rpm 离心5min,弃去上清液,用2 mL的冷CaCl2溶液悬浮。8 分装到数个EP管中,每管200 uL,冷冻保存备用。实验二:目的基因质粒(T-SOD或T-IL218)和表达载体质粒(PET32或PET30)的转化及大量提取【实验步骤】一、载体的转化(无菌条件,冰上进行)1、取200 uL 新鲜制备的感受态细胞,

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